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PCR常用熒光染料的化學結構介紹
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| 發布時間：
2017-05-27
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1677
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PCR常用熒光染料的化學結構：
熒光染料溴化乙錠，EtBr分子結構最常用、最便宜的DNA/RNA染色劑（結構如上圖）。在瓊脂糖膠里，EtBr的靈敏度是檢測到至少1 ng 的DNA。染色過程可以是通過制作含有EtBr的瓊脂糖膠，或者是在跑完膠后對整個膠體用EtBr稀釋液染色。EtBr在紫外光照射下散發出橘黃色的光，當EtBr與DNA結合后，發光量大大增強。這就是為什么一整塊經過EtBr處理的瓊脂糖膠，在紫外光下，只有DNA所在的地方會發出強光，而不是整塊膠都強光閃閃。EtBr即給DNA染了色，也標記了DNA，讓我們了解到目標DNA的長短。唯一的不好就是，EtBr是潛在的可致癌誘變劑，所以在使用的時候一定要避免直接接觸，使用有效防護，注意安全。
熒光染料SYBR系列Thermo Fisher 出產的SYBR系列主要有三種：SYBR-Green，SYBR-Gold和SYBR-safe。SYBR-Gold有超高靈敏度（最低檢測25 pg DNA），而SYBR-Green靈敏度稍低一些（大概在最低 60 pg DNA），SYBR-safe和EtBr靈敏度相似。不同于EtBr，SYBR系列染料不僅可以被紫外光激發，還可以被藍光激發，因此避免了紫外光可能對DNA樣本造成的破壞或突變。根據名字，我們也可以知道SYBR-safe是安全的、無害的，但另外兩種卻是潛在致癌物，使用時要小心。
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