熒光探針和時間分辨成像因其高靈敏度,高空間分辨率和簡易性,廣泛使用于復雜生物體系中,這種技術對于闡明生物功能提供了一個良好的平臺。時間分辨熒光顯微鏡在監測目標熒光方面具有優勢,與傳統使用熒光團進行熒光成像中幾個納秒的壽命尺度相比,長壽命的發光染料可以利用脈沖激發光與測量時刻,通過適當的延遲以及門控技術使得收取的信號消除背景熒光,并提供高的信號-噪聲比。典型的有機磷光染料如曙紅以及一些貴金屬配合物,因為它們較長的磷光壽命有著高的是很好時間分辨成像染料。
在以往被報道應用于時間分辨成像中的長壽命發光染料,大多數是使用具有長壽命三重態的磷光材料,磷光過程中存在著自旋禁阻,磷光材料往往通過引入Ir(Ⅲ),Pt(Ⅱ),Ru(Ⅱ)等貴金屬形成配合物的方式提高其三重態量子產率進而增強其發光性能。
這些磷光材料中的一些化合物會通過單線態氧將三重態能量轉移到周圍的細胞或組織中的生物分子而殺死細胞,同時一些金屬配合物具有大的細胞毒性,因而抑制了這些染料應用于時間分辨成像中。為了增長熒光染料的壽命同時避免重金屬配合物對細胞的毒性效應,有必要開發新型的長壽命的熒光染料。